淺析ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中抗體效價(jià)的檢測方法

更新時(shí)間：2021-09-10

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　　ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中抗體效價(jià)的檢測方法，在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，抗體的重要性關(guān)系到實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯晒?，但是大多時(shí)候很多同學(xué)都沒有意識到，或者不知道怎么樣評價(jià)抗體的質(zhì)量，今天我們來了解一下有哪些方法可以檢測抗體的質(zhì)量，一般來說抗血清質(zhì)量的評價(jià)主要通過一下幾種方法

　　放射免疫法：以不同稀釋度的抗血清與優(yōu)質(zhì)符號抗原混合，孵育24h后，測定其結(jié)合率。一般以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價(jià)。如某抗血清的結(jié)合率為50%時(shí)的稀釋度為1：15000，則該血清的效價(jià)就是1：15000。抗血清的效價(jià)，除由抗血清自身的性質(zhì)決議外，還受符號抗原的質(zhì)量、孵育時(shí)刻，所用稀釋液的成分及其pH等要素的影響，在工作中有必要引起留意。

　　雙向分散法：使用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上分散，兩者在相交處發(fā)生沉積線，以調(diào)查和判別抗血清中是否有抗體及其濃度。

　　球脂板的制備：100ml pH7.1 的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi)，于水浴中加溫，攪拌，使瓊脂*溶解，趁熱用紗布過濾，待溶液冷卻到65℃左右時(shí)，參加疊氮鈉，使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在潔凈平皿或玻片上，約3mm厚，待其冷卻，*凝固后，用打孔器打孔。中心孔內(nèi)加適量抗原，周圍各孔內(nèi)分別參加50μl 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清，37℃下孵育24h，調(diào)查有無沉積線發(fā)生，以判別血清的稀釋度。

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